高通量细胞克隆筛选系统 ClonePix 2 全自动的筛选流程可以在更短时间内筛选更多克隆。经过已有用户证明,可以显著提高筛选效率、克隆产量,并节省时间和成本。
主要特性:
1.更短时间筛选更多克隆
2.优质图像结合智能化分析软件
3.准确、自动化克隆挑选,避免有限稀释,
4.增加生物治疗药物细胞系的产量
创新的筛选流程更少时间筛选更多克隆:
缩短细胞系和抗体开发时间:
挑取表达水平更优的细胞克隆:
1.使用半固体培养基培养细胞,获得独立的单个细胞克隆
2.高通量细胞克隆筛选系统 ClonePix 2 可以快速筛选上万个克隆
- 大大增加找到更优克隆的概率
- 白光成像用于识别克隆位置
- 荧光成像用于定量表达水平
3.多种检测方法可选
- 不用标记,直接检测杂交瘤分泌的 IgG 或抗原特异性 MAbs
- 检测加入标记的重组蛋白或表达的荧光标记蛋白
4.客观的成像分析,使用户可以准确筛选到更优表达水平的克隆,并尽可能早的排除表达水平低的干扰克隆
5.根据克隆表达水平自动排序,并准确、自动化挑取克隆,避免有限稀释的繁琐和出错几率。
满足药品监管的要求:
针对人 IgG 的项目,使用不含动物源成份的试剂:CloneMedia,CloneMatrix,Recombinant CloneDetect 以及 XP media。
确保形成独立的单克隆:
使用 CloneMedia 半固体培养基培养细胞,有利于增加铺板效率和形成独立单个克隆,有利于克隆识别和挑取。
1.基于多种基础培养基,针对 高通量细胞克隆筛选系统 ClonePix 2 的应用进行专门优化
2.适用于多种细胞,经过优化和验证的专用培养基可选:Per.C6,CHO-s,CHO DG44,HEK,CHOK1SV,杂交瘤以及骨髓瘤细胞等
3.有标准成份,无动物源成份以及无谷氨酰胺成份等多种培养基可选,
4.使用 CloneMatrix 甲基纤维素浓缩液,用户自己配制特殊用途培养基
CloneMedia 培养基获得的克隆,使用 CloneSelect Imager 成像
不同于传统的培养方法,半固体培养基的细胞铺板密度更高,并且可以保证形成独立的单个克隆,有利于下一步单克隆的挑取。
一个成熟的培养方法
使用半固体培养基培养细胞形成克隆,这种方法已经非常完善:
“EASIER TO PLATE OUT LARGE NUMBERS OF CELLS AND TO RECOVER MANY INDEPENDENT HYBRIDOMA CLONES”
A simple, single-step technique for selecting and cloning hybridomas for the production of monoclonal antibodies (J. Immun. Methods (1982) 50, 161-171)
目标蛋白检测:
使用基于荧光的方法检测分泌蛋白
荧光耦联的 CloneDetect 检测试剂可以原位检测分泌表达的人、小鼠以及大鼠抗体。因为克隆本身不需要产生荧光,所以不需要对目标蛋白加入额外荧光标记分子。
1.根据实验检测要求以及表达蛋白类型,选择合适的检测试剂,比如 FITC 标记抗人检测试剂
2.加入液体检测试剂到半固体培养基
3.高通量细胞克隆筛选系统 ClonePix 2 对克隆进行成像、分析并根据所有克隆的荧光信号水平进行排序
检测方法的选择
检测分泌 IgG 的单克隆抗体
高质量成像,智能化分析:
成像
1.白光和荧光成像可以用于计算克隆的大小以及荧光强度(代表目标蛋白的表达量)。
数据显示:
1.软件根据克隆的荧光强度、大小等物理参数对克隆自动进行排序,得到所有克隆的 2D 柱状图表。
2.克隆的筛选和选取主要依据以下参数:
- 大小,边缘圆度以及克隆距离
- 根据荧光强度排序
- 用户可以通过软件中设置“proximity”的值,去掉距离太近的克隆
数据追踪:
1.软件自动将所有克隆的统计信息排列成表,可以随时导出想要克隆的信息
2.软件按照用户自定义的顺序挑取克隆到 96 孔板,并自动记录克隆来源、位置信息以及荧光强度等统计学参数
克隆挑取和转移:
1.用户可以根据成像数据和统计分析的结果自定义最终要挑取的克隆数目和挑取顺序
2.系统自动选择用户自定义的克隆,并将每个克隆转移到 96 孔目标微孔板,用于培养后进一步分析或克隆扩大培养
3.XP Medi a CHO Growth A 是针对 CloneMedi a CHO Growth A 半固体培养基专门优化,适用于挑取克隆进一步放大培养的液体培养基,可以获得更好的挑取后生长效果。
快速筛选特异性抗体克隆:
高通量细胞克隆筛选系统 ClonePix 2 可以从融合后自动化筛