生命现象以细胞为基本单位，一切细胞行为都有其分子基础，小分子药通过干预分子链条发挥作用，分享一篇小分子相关文章，具体内容如下：

磷酸化是细胞信号传递的重要环节，胞内存在磷酸酶，通过去磷酸化，抑制信号传递。作者关注磷酸酶PTPN2，有文献报道，PTPN2缺陷会引起自身免疫病，暗示“搞掉”PTPN2可调动免疫细胞，这对于肿瘤免疫是件好事，作者想设计PTPN2抑制剂，通过阻断去磷酸化，促进信号传递，调动肿瘤免疫（左侧PTPN2工作示意图来源于网络）

PTPN2和PTPN1活性位点高度类似，作者进行了基于结构的药物设计（酸性-红色，碱性-蓝色）

Thiadiazolidinone dioxide基团至关重要，可以插入活性位点和多个氨基酸互作

先找到了化合物A-650，又优化出化合物AC484，两者都以促进STAT1磷酸化

化合物AC484药代动力学

所有细胞内部都存在磷酸化介导的信号传递，先看化合物作用于肿瘤细胞：提高肿瘤细胞对IFNr的敏感度（有篇Nature讲IFNr引起肿瘤细胞铁死亡 CD8+ T cells regulate tumour ferroptosis during cancer immunotherapy [J] Nature, 2019.）    

基因层面说明化合物使肿瘤细胞对IFNr更敏感

化合物AC484使肿瘤细胞对IFNr更敏感，STAT1磷酸化增加、CXCL9/10分泌增加

IFNr还可以促进肿瘤细胞抗原提呈，化合物AC484使肿瘤细胞对IFNr更敏感，抗原提呈更多，进而促进T细胞对肿瘤细胞的识别杀伤

看完肿瘤细胞看T细胞，化合物AC484使T细胞对于刺激更加敏感，促进T细胞激活、分泌细胞因子

化合物AC484促进T细胞响应刺激-激活、分泌细胞因子

化合物AC484促进T细胞响应刺激-传递信号

化合物AC484促进T细胞响应刺激-增殖

T细胞看完，用全血再看，化合物AC484促进全血磷酸化信号

化合物AC484促进全血响应TCR刺激 – 至此，说明了化合物AC484同时影响肿瘤细胞和T细胞，可以从这两方面发挥积极作用

开始体内实验：小鼠体内，促进细胞因子分泌，对体重影响小，暗示安全性

化合物AC484体内抑瘤、延长小鼠存活时间（可以看到PD-1单抗hold不住的，AC484可以）

AC484和PD-1单抗联用

量效

化合物AC484还可以抑制肿瘤转移

免疫缺陷小鼠NSG上，化合物AC484无法抑制肿瘤生长，暗示起效依赖免疫系统

靶点PTPN缺陷的肿瘤上化合物AC484仍有效，暗示化合物可以不通过作用在肿瘤细胞上起效

耐受肿瘤re-challenge，暗示介导产生了免疫记忆

对于正常肿瘤细胞，化合物AC484起效依赖CD8 T细胞；当肿瘤细胞jak1缺陷，起效依赖NK细胞

AC484促进免疫细胞浸润到肿瘤部位

取肿瘤部位免疫细胞，单细胞测序，化合物AC484促进肿瘤免疫正向细胞（如ISGhigh 单核细胞、CD8 T效应细胞），调低负向细胞（如MDSC、M2）

化合物AC484改善肿瘤微环境，提高肿瘤微环境内淋巴/髓系细胞比、M1/M2巨噬细胞比

化合物AC484提高肿瘤部位TCR多样性

深度挖掘单细胞测序数据，细看肿瘤部位T细胞和NK细胞：化合物AC484作用后，NK、T细胞被调动，Treg细胞减少

文献报道，PTPN2缺陷后T细胞存在疲劳的问题，作者分选疲劳细胞SLAMF6+ (progenitor exhausted)、TIM-3+ (terminally exhausted)，测序，发现化合物AC484作用后，肿瘤部位疲劳的CD8 T呈现不同的状态

AC484组的疲劳细胞更呈现记忆、效应亚型，肿瘤免疫正向信号通路水平更高

前面是通过测序数据说明化合物AC484调动了免疫，流式实际在细胞层面进行验证：促进效应细胞浸润到肿瘤部位

化合物调动CD8 T细胞、NK细胞、巨噬细胞

化合物缓解CD8 T细胞疲劳

化合物AC484促进TILs、T细胞磷酸化信号

化合物AC484促进T细胞呼吸，增加T细胞线粒体含量

化合物AC484促进T细胞呼吸

化合物AC484处理过的T细胞移植给荷瘤小鼠，抑瘤、延长小鼠存活效果更好

化合物AC484促进NK细胞生成颗粒酶B、杀肿瘤细胞

化合物缓解T细胞疲劳，增强其耐力，使其战斗力更强

又是一个肿瘤免疫相关靶点，备忘，我们有相关专题 肿瘤免疫靶点

参考文献：

Christina K. Baumgartner, Hakimeh Ebrahimi-Nik, Arvin Iracheta-Vellve, Keith M. Hamel, Kira E. Olander, Thomas G. R. Davis, Kathleen A. McGuire, et al. The PTPN2/PTPN1 inhibitor ABBV-CLS-484 unleashes potent anti-tumour immunity [J]Nature, 4 October 2023.